泰国R61猛鬼公路常年笼罩在死亡阴影之下：腐尸淌着黯黑冰冷的血液，死乌鸦铺满公路尽头，空气中充斥着令人窒息的腐臭，岛上更是不时传来凄厉诡异的惨叫。这里车祸频发，因被传言为“无人生还的死亡之路”而令人闻之色变。
《孤岛惊魂2》的主人公周晴与周喜是年轻漂亮的双胞胎姐妹，由邓家佳一人分饰两角。近来，周喜的生活不断被与车祸有关的噩梦侵扰；与此同时，在泰国工作的姐姐周晴突然神秘失踪。接连发生的怪事让周喜隐约察觉姐姐可能遭遇不测，于是她毅然辞去工作，独自踏上前往泰国寻找姐姐的旅途。
这是周喜第一次出远门。她来到周晴在泰国暂住的小屋，在这座阴森诡异的房子里，遇见了自称周晴男友的陌生男子张来（陈志朋饰）。为了查明周晴的下落，周喜与张来根据地图指引，前往传说中的“猛鬼公路”，同行的还有张来的泰国朋友“黑龙王”。
三人刚进入猛鬼公路区域，便遭遇了一连串惊险离奇的事件。一辆大货车如同阴魂不散的恶鬼般紧追不舍，杀手也始终如影随形，死亡追逐随时可能将他们吞噬。周喜终于幸运地找到了周晴，以为真相即将揭开，却没想到自己已一步步落入一个又一个精心布置的陷阱。
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