《自杀小队》中，政府秘密机构负责人阿曼达（维奥拉·戴维斯 Viola Davis 饰）面对接连不断的暴力与恐怖袭击，决定启用一群被关押在监狱、被判处无期徒刑的超级反派，组建一支特殊队伍。他们包括小丑女（玛歌特·罗比 Margot Robbie 饰）、死亡射手（威尔·史密斯 Will Smith 饰）、回旋镖队长（杰·科特尼 Jai Courtney 饰）、复仇恶魔（杰伊·赫尔南德兹 Jay Hernandez 饰）以及杀手鳄（阿德沃尔·阿吉纽依-艾格拜吉 Adewale Akinnuoye-Agbaje 饰）。
这群危险人物接到的任务，是对抗拥有强大法力的魅巫（卡拉·迪瓦伊 Cara Delevingne 饰）。魅巫与哥哥联手制造出一种极其危险的武器，企图借此控制全人类。与此同时，阿曼达还要提防危险人物小丑（杰瑞德·莱托 Jared Leto 饰），因为他为了营救女友小丑女，什么手段都愿意使用。
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