《少女骑士物语》讲述了水野贵弘的故事。曾经在日本马上长矛比武中战无不胜的他，为了检验自己的实力，远赴国外留学并参加各项赛事。然而在一次大会上，他意外受伤并因此落败，随后告别马上长矛比武，转而成为骑士辅助人员。临近新一届马上长矛大赛之际，为了培养出优秀的骑士，水野贵弘以辅助员的身份进入学校，并在那里遇见了形形色色的高贵大小姐们。这个曾经遭遇挫折的骑士，如今将以骑士辅佐员的身份，与少女骑士们一同迎接持久而激烈的战斗。
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