《谁陷害了兔子罗杰》讲述了发生在美国洛杉矶图恩城的故事。这里是卡通人物聚居的地方，卡通明星兔子罗杰由查尔斯·弗莱舍配音，他怀疑妻子杰西卡（凯瑟琳·特纳 Kathleen Turner 配音）与人有染，因此在拍戏时频频走神，还遭到搭档娃娃哈曼的嘲讽。
卡通电影公司老板马隆于是聘请私人侦探埃迪（鲍勃·霍斯金斯 Bob Hoskins 饰）调查此事，并拍下杰西卡偷情的照片，希望借此让罗杰彻底断绝这段感情，重新专心拍摄卡通系列片。埃迪的弟弟特迪不久前曾被图恩城的卡通角色暗害，他也想尽快查出凶手，便答应了马隆的委托。
然而，随着调查逐步深入，埃迪发现事情远比表面复杂，案件背后似乎还牵涉另一段奸情。既然已经接受委托，他也无法轻易放弃，只能继续追查真相。埃迪最终能否揭开事件背后的秘密？影片改编自加里·沃尔夫的同名畅销小说，是一部真人表演与动画相结合的作品。
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